Цев за центрифугу је једноставна цев која може да издржи велику брзину ротације и притисак, као што је одвајање неких узорака и одвајање супернатанта.Цев за ултрафилтрациону центрифугу има два дела слична унутрашњој и спољашњој цеви.Унутрашња цев је мембрана са одређеном молекулском тежином.Током центрифугирања великом брзином, они са мањом молекулском тежином ће процурити у доњу цев (тј. спољну цев), а они са већом молекулском масом ће бити заробљени у горњој цеви (тј. унутрашњој цеви).Ово је принцип ултрафилтрације и често се користи за концентрисање узорака.
Епрувете за ултрафилтрациону центрифугу обично се могу користити без претходног третмана, али за обраду узорака протеина, посебно за разблажене протеинске растворе (< 10 уг / мл), стопа опоравка концентрације са ултрафилтрационим мембранама често није квантитативна.Иако ПЕС материјали минимизирају неспецифичну адсорпцију, неки протеини, посебно када су разблажени, могу имати проблема.Степен неспецифичног везивања варира у зависности од структуре појединачних протеина.Већа је вероватноћа да ће се протеини који садрже наелектрисане или хидрофобне домене неповратно везати за различите површине.Претходни третман пасивације на површини епрувете за ултрафилтрациону центрифугу може смањити губитак адсорпције протеина на површини мембране.У већини случајева, предтретман колоне пре концентрисања раствора разблаженог протеина може побољшати стопу опоравка, јер раствор може попунити празна места адсорпције протеина изложена на мембрани и површини.Метода пасивизације је да се колона претходно натопи већом запремином раствора за пасивирање дуже од 1 сата, темељно опере колону дестилованом водом, а затим је једном центрифугира дестилованом водом да би се потпуно уклонио пасивациони раствор који може остати на филму. .Пазите да се филм не осуши након пасивирања.Ако желите да га користите касније, потребно је да додате стерилну дестиловану воду да филм остане влажан.
Епрувете за ултрафилтрациону центрифугу се обично не могу стерилисати и поново користити.Пошто цена једне цеви није јефтина, многи људи покушавају да је поново искористе – искуство је да се површина мембране очисти дестилованом водом више пута и центрифугира једном или два пута.Мала цевчица која се може центрифугирати у обрнутом смеру може се потопити у дестиловану воду, а затим центрифугирати у обрнутом смеру више пута, што ће бити боље.Може се више пута користити за исти узорак и може се натопити дестилованом водом када се не користи, али треба спречити бактеријску контаминацију.Немојте мешати различите узорке.Неки људи кажу да намакање у 20% алкохола и 1н НаОХ (натријум хидроксида) може спречити раст бактерија и спречити сушење.Све док ултрафилтрациона мембрана продире у воду, не може се дозволити да се осуши.Међутим, други кажу да ће уништити структуру мембране.У сваком случају, произвођачи углавном не подржавају поновну употребу.Поновљена употреба ће блокирати величину пора филтерске мембране, па чак и изазвати цурење течности, што ће утицати на експерименталне резултате.
Време поста: 05.09.2022